Il Santuario si trova nei pressi dei ruderi della villa romana di Quintilio Varo, appena fuori Tivoli, lungo una strada panoramica che affaccia sulla Valle dell’Inferno, dove scorre l’Aniene. Al suo interno è custodita la venerata immagine della Madonna di Quintiliolo, risalente al XIII sec. Secondo la leggenda un contadino, Sant’Isidoro, mentre arava il campo vide i suoi buoi inginocchiarsi e dalla terra emergere la sacra icona. La devozione della popolazione contadina di Tivoli, che pregava Maria nella speranza di buoni raccolti, è ancora oggi rievocata nella sentitissima processione che si tiene a Tivoli, ogni prima domenica di maggio.